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管碟法测定抗生素效价


录入时期:2011-6-24 9:40:59 原因:互联网

一、目标和要求
1. 了解管碟法的原理。
2. 掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算手段。
二、原理
抗生素的生物检定是以抗生素对微生物的抗菌效力作为效价的权衡法度规范,已被各国药典遍及采用,新宝GG登录平台。具有与应用原理相一致、用量少和聪敏度初等优点。新宝GG登录平台。管碟法是琼脂分散法中的一种。
当抗生素在菌层培育提拔基中分散时,从而展现透明的抑菌圈。凭据分散定律的推导,新宝GG登录平台。试验菌就被抑制而不能滋生,当抗生素浓度到达或高于MIC(最低抑制浓度)时,即分散中心浓度高而边缘浓度低。因此,会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度。
三、实验质料
1. 四环素类抗生素的法度规范品和样品。
2. 试验菌:藤黄八叠球菌(Sarcina lutea)。
3. 培育提拔基:新宝GG平台内部主管。250ml三角瓶分装150ml LB琼脂,150ml三角瓶分装50ml LB琼脂。
4. 灭菌物品:培育提拔皿,15×150mm试管,弯头镊子,pH6.新宝GG直属。0的磷酸缓冲液,1ml吸管,滴管,高度:10.新宝GG招商。0±0.1mm),外径:7.8±0.1mm,牛津杯(内径:6.0±0.1mm。
5. 其它:解析天平,水平仪,玻璃板,容量瓶。
四、实验实行
1. 配制法度规范品溶液
2. 配制样品溶液
3. 制备菌悬液。
4. 制备平板:
(1)取6套无菌培育提拔皿,置水平玻璃板上凝集,新宝GG主管。星散别离参加约20mlLB培育提拔基后。
(2)另取冷却至50℃左右的50ml LB培育提拔基,作为菌层,新宝GG代理。用10ml破口吸管取6ml混菌培育提拔基倒在底层平板上,迅速摇匀后,参加1ml试验菌悬液。
5. 在培育提拔基平板底部作好相应标志。
6. 用滴管星散别离将高、低浓度的法度规范品和样品溶液参加到牛津杯中,以滴满为度。
7. 将培育提拔皿安稳送入恒温箱。
8. 用游标卡尺丈量抑菌圈直径

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